Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Glutathione reductase双切口酶质粒(h): sc-417499-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Glutathione reductase 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Glutathione reductase双切酶质粒（h）和Glutathione reductase双切酶质粒（h2）编码针对GSR的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Glutathione reductase: sc-133245，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Glutathione reductase双切口酶质粒(h) | sc-417499-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Glutathione reductase双切口酶质粒(h2) | sc-417499-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 GSR 基因编码谷胱甘肽还原酶，这是一种黄素蛋白氧化还原酶，利用 NADPH 将氧化型谷胱甘肽（GSSG）还原为还原型谷胱甘肽（GSH），从而维持细胞的氧化还原缓冲能力。通过维持 GSH/GSSG 比值，GSR 支持对活性氧（ROS）和亲电体的解毒过程，与谷胱甘肽依赖性过氧化物酶活性相互衔接，并参与线粒体与细胞质内的氧化还原调控。该酶与磷酸戊糖途径等产生 NADPH 的代谢过程相耦联，并有助于保持硫醇稳态，而硫醇稳态会影响蛋白质折叠、信号传导以及抗氧化防御。谷胱甘肽循环异常和氧化还原失衡常在多种研究背景下被关注，包括对氧化应激的易感性、溶血性表型、代谢功能障碍以及肿瘤生物学；在这些情况下，依赖 GSR 的通路可调节细胞适应性与应激反应。
Glutathione reductase 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 GSR 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GSR内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏GSR的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了GSR基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。