Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Double Nickase Plasmid (h): sc-404694-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Double-Nickase-Plasmid (h) und Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf GPX7 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Double Nickase Plasmid (h) | sc-404694-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-404694-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPX7 kodiert die Glutathionperoxidase 7, eine im endoplasmatischen Retikulum lokalisierte Thiol-Peroxidase, die die Anreicherung von Wasserstoffperoxid und Lipidhydroperoxiden begrenzt und zur Aufrechterhaltung der Homöostase der Proteinfaltung beiträgt. Durch die Unterstützung der Redoxpufferung und der ER-Proteinkontrolle ist GPX7 in oxidativen Stressantworten und die Signalwege der Unfolded-Protein-Response (UPR) eingebunden und beeinflusst unter Stress Sekretion, Proteostase und Zellüberleben. Eine veränderte GPX7-Aktivität wurde mit fehlregulierter Redoxsignalgebung, erhöhter Empfindlichkeit gegenüber ER-Stress sowie Veränderungen in Proliferations- und Apoptoseprogrammen in verschiedenen krankheitsrelevanten Kontexten in Verbindung gebracht, darunter entzündungsassoziierte Gewebeschädigung und Tumorbiologie. Daher wird GPX7 häufig in Modellen für oxidative Schädigung, Proteostase-Ungleichgewicht und redoxabhängige Signalnetzwerke untersucht.
Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des GPX7-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von GPX7 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die GPX7-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit GPX7-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.