Glutathione Peroxidase 1/GPX1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-400631

Übersicht

GPX1 kodiert das zytosolische Selenoenzym Glutathionperoxidase 1, ein zentrales Protein der antioxidativen Abwehr, das Wasserstoffperoxid und Lipidhydroperoxide unter Verwendung von Glutathion als Elektronendonor reduziert. Durch die Begrenzung der Anreicherung reaktiver Sauerstoffspezies trägt GPX1 zur Aufrechterhaltung der Redox-Homöostase bei und beeinflusst Signalnetzwerke, die mit oxidativen Stressantworten verknüpft sind, darunter NRF2-regulierte Programme, die Mitochondrienfunktion und entzündliche Signalwege. Eine veränderte GPX1-Aktivität wurde mit Mechanismen in Verbindung gebracht, die für die Krebsbiologie, metabolische Dysfunktion, Neurodegeneration und kardiovaskuläre Pathologien relevant sind, bei denen ein Redox-Ungleichgewicht Phänotypen der Zellüberlebens- und Stressanpassung umgestalten kann. Als breit exprimiertes Enzym wird GPX1 häufig eingesetzt, um zu untersuchen, wie antioxidative Kapazität DNA-Schadensantworten, die Empfindlichkeit gegenüber Ferroptose und zelluläre Reaktionen auf Hypoxie oder entzündliche Reize moduliert.

Das Glutathione Peroxidase 1/GPX1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des GPX1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des GPX1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von GPX1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Glutathione Peroxidase 1/GPX1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von GPX1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Glutathione Peroxidase 1/GPX1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf GPX1-Exone abzielen, die für die Glutathione Peroxidase 1/GPX1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere GPX1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Glutathione Peroxidase 1/GPX1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Glutathione Peroxidase 1/GPX1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des GPX1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Glutathione Peroxidase 1/GPX1 HDR-Plasmid (h) und Glutathione Peroxidase 1/GPX1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von GPX1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten GPX1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.