Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
GLUD1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402187
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- GLUD1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico GLUD1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
GLUD1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402187 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
GLUD1 codifica la glutamato deshidrogenasa mitocondrial 1 (GDH1), una enzima dependiente de NAD(P)+ que cataliza la desaminación oxidativa reversible del glutamato a α-cetoglutarato y amoníaco, conectando el metabolismo de aminoácidos con el ciclo del TCA y el equilibrio redox celular. Al controlar el flujo entre la glutaminólisis y el metabolismo oxidativo, GLUD1 influye en la bioenergética mitocondrial, el manejo del nitrógeno y la reposición anaplerótica del metabolismo central del carbono. La alteración de la actividad de GDH1 se ha asociado con desregulación metabólica que afecta la secreción de insulina y la homeostasis de neurotransmisores excitadores, lo que convierte a GLUD1 en un objetivo relevante en estudios de metabolismo mitocondrial y señalización neuroendocrina.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO GLUD1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GLUD1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GLUD1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GLUD1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GLUD1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GLUD1 para la investigación de la señalización de GLUD1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de GLUD1 críticos para la función de GLUD1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GLUD1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido GLUD1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GLUD1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GLUD1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GLUD1 (h) y el plásmido HDR GLUD1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GLUD1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GLUD1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.