Glucose Transporter Glut8 Double Nickase Plasmid (h): sc-403183-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Glucose Transporter Glut8 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Glucose Transporter Glut8 Double-Nickase-Plasmid (h) und Glucose Transporter Glut8 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf SLC2A8 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Glucose Transporter Glut8 Double Nickase Plasmid (h) | sc-403183-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Glucose Transporter Glut8 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403183-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC2A8 kodiert den Glukosetransporter Glut8 (GLUT8), einen erleichterten Zuckertransporter, der je nach Gewebe und Kontext zur zellulären Kohlenhydrataufnahme und zur intrazellulären Glukoseverteilung beiträgt. Die GLUT8-Aktivität unterstützt die metabolische Homöostase, indem sie den glykolytischen Fluss, den Glykogenstoffwechsel und umfassendere, insulinabhängige Programme des Nährstofftransports beeinflusst, mit nachgelagerten Effekten auf Energiesignalwege wie AMPK und mTOR. Die Regulation der SLC2A8-Expression und des Transporter-Traffickings wurde im Zusammenhang mit endokrinen und metabolischen Phänotypen untersucht, darunter Insulinresistenz und eine veränderte Glukoseverwertung. Da der Glukosetransport anabole und Redox-Anforderungen begrenzt, ist SLC2A8 auch für mechanistische Arbeiten zu Proliferation, Differenzierung und Stressanpassung in metabolisch aktiven Zellen relevant.
Glucose Transporter Glut8 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des SLC2A8-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von SLC2A8 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die SLC2A8-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit SLC2A8-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.