Glucose Transporter Glut8 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-424976
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Glucose Transporter Glut8 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im Glucose Transporter Glut8-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Glucose Transporter Glut8 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-424976 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Slc2a8 kodiert den Glukosetransporter GLUT8, einen erleichterten Hexosetransporter, der in Maus-Zellen zur intrazellulären und membranassoziierten Glukosehandhabung beiträgt. GLUT8 unterstützt die zelluläre Energiebilanz, indem er die Glukoseverfügbarkeit für die Glykolyse und nachgeschaltete Stoffwechselwege reguliert, und steht funktionell mit insulinabhängiger Nährstoffsensorik sowie organspezifischer metabolischer Homöostase in Verbindung. In spezialisierten Geweben kann eine veränderte Slc2a8-Aktivität den Glukosefluss, den oxidativen Stoffwechsel und Stressantworten beeinflussen, die sich mit endokriner und reproduktiver Physiologie überschneiden. Eine Fehlregulation von Transportprozessen der GLUT-Familie ist allgemein relevant für Modelle metabolischer Dysfunktion und für Studien dazu, wie Nährstofftransport zelluläre Programme für Wachstum, Differenzierung und Überleben prägt.
Das Glucose Transporter Glut8 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Slc2a8-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Slc2a8-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Slc2a8 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Glucose Transporter Glut8-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Slc2a8-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Glucose Transporter Glut8-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Slc2a8-Exone abzielen, die für die Glucose Transporter Glut8-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Slc2a8-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom Glucose Transporter Glut8 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Glucose Transporter Glut8 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Slc2a8-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Glucose Transporter Glut8 HDR-Plasmid (m) und Glucose Transporter Glut8 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Slc2a8-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Slc2a8-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.