Glucose Transporter Glut8 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-424976

Panoramica

Slc2a8 codifica per il trasportatore di glucosio GLUT8, un trasportatore facilitato di esosi che contribuisce alla gestione del glucosio a livello intracellulare e associata alla membrana nelle cellule murine. GLUT8 sostiene l’equilibrio energetico cellulare regolando la disponibilità di glucosio per la glicolisi e per le vie metaboliche a valle, con collegamenti funzionali al sensing dei nutrienti insulino‑responsivo e all’omeostasi metabolica specifica d’organo. Nei tessuti specializzati, un’alterata attività di Slc2a8 può influenzare il flusso di glucosio, il metabolismo ossidativo e le risposte allo stress, in modo intrecciato con la fisiologia endocrina e riproduttiva. La disregolazione dei processi di trasporto della famiglia GLUT è ampiamente rilevante per modelli di disfunzione metabolica e per studi su come il trasporto dei nutrienti plasmi i programmi cellulari di crescita, differenziamento e sopravvivenza.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Glucose Transporter Glut8 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Slc2a8 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Slc2a8 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Slc2a8 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Glucose Transporter Glut8.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Slc2a8 per lo studio della segnalazione di Glucose Transporter Glut8, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Slc2a8 critici per la funzione di Glucose Transporter Glut8
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Slc2a8 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Glucose Transporter Glut8 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Glucose Transporter Glut8 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Slc2a8. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Glucose Transporter Glut8 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Glucose Transporter Glut8 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Slc2a8 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Slc2a8 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.