Glucose Transporter Glut5 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401907-LAC

SLC2A5 kodiert den erleichterten Hexosetransporter GLUT5, einen hochaffinen Fructosetransporter, der vorwiegend in der Plasmamembran resorptiver Epithelzellen sowie weiterer metabolisch aktiver Gewebe lokalisiert ist. Durch die Vermittlung der Fructoseaufnahme unterstützt GLUT5 den zellulären Kohlenstoffeintrag in Glykolyse und Lipogenese und ist mit nährstoffsensitiven Signalwegen sowie metabolischer Reprogrammierung verknüpft. Eine veränderte SLC2A5-Expression wurde mit Veränderungen in der Fructoseverwertung, mit oxidativen und entzündlichen Stressantworten sowie mit gewebespezifischen metabolischen Phänotypen in Verbindung gebracht, die für Störungen des Kohlenhydratstoffwechsels und die Nährstoffnutzung von Tumorzellen relevant sind. Als Solute-Carrier-Transporter dient GLUT5 außerdem als Modell zur Untersuchung der Kinetik des Membrantransports, der Substratselektion und der Regulation durch ernährungs- und hormonabhängige Signale.

Glucose Transporter Glut5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente SLC2A5-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Glucose Transporter Glut5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der SLC2A5-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Glucose Transporter Glut5-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen SLC2A5-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.