Glucose Transporter Glut3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423000

Übersicht

Slc2a3 kodiert den hochaffinen, erleichterten Glukosetransporter GLUT3, der in Mauszellen mit erhöhtem Stoffwechselbedarf – darunter Neuronen und aktivierte Immunzellpopulationen – einen zentralen Weg für die basale Glukoseaufnahme darstellt. Durch die Regulation der intrazellulären Glukoseverfügbarkeit unterstützt GLUT3 den glykolytischen Flux, die ATP-Produktion und biosynthetische Signalwege, die Nährstoffsensorik mit Zellüberleben und Proliferation koppeln. Eine veränderte GLUT3-Aktivität kann das Redoxgleichgewicht sowie metabolische Signalnetzwerke wie AMPK und mTOR verschieben und dadurch Stressantworten und Differenzierungsprogramme beeinflussen. Eine dysregulierte Glukosetransportfunktion wird häufig im Kontext von Neurobiologie, Entzündung und stoffwechselgetriebenen Krankheitsphänotypen untersucht, bei denen Veränderungen der Glukoseverwertung zur Pathophysiologie beitragen.

Das Glucose Transporter Glut3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Slc2a3-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Slc2a3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Slc2a3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Glucose Transporter Glut3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Slc2a3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Glucose Transporter Glut3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Slc2a3-Exone abzielen, die für die Glucose Transporter Glut3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Slc2a3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Glucose Transporter Glut3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Glucose Transporter Glut3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Slc2a3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Glucose Transporter Glut3 HDR-Plasmid (m) und Glucose Transporter Glut3 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Slc2a3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Slc2a3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.