Plasmide Double Nickase (h) Glucagon Receptor: sc-402018-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Glucagon Receptor correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Glucagon Receptor Double Nickase (h) et le plasmide Glucagon Receptor Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GCGR. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Glucagon Receptor | sc-402018-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Glucagon Receptor | sc-402018-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **GCGR** code le récepteur du glucagon, un récepteur couplé aux protéines G de classe B qui régule la production hépatique de glucose et l’équilibre énergétique de l’organisme en réponse au glucagon. Après liaison du ligand, **GCGR** se couple principalement à **Gs**, ce qui augmente l’AMPc et active la **PKA**, en s’intégrant à des programmes transcriptionnels dépendants de **CREB** qui régulent la gluconéogenèse, la glycogénolyse et le métabolisme lipidique. La signalisation de **GCGR** s’articule avec la contre‑régulation insuline–glucagon, la détection des nutriments et le contrôle endocrinien de l’homéostasie métabolique. Une activité dérégulée de la voie **GCGR** est impliquée dans des phénotypes pertinents pour les maladies métaboliques, notamment des altérations du contrôle glycémique, de la gestion des lipides hépatiques et un dysfonctionnement de l’axe endocrinien pancréas–foie.
Glucagon Receptor Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GCGR dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GCGR. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GCGR. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GCGR.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.