GLTSCR1L Double Nickase Plasmid (h): sc-407155-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das GLTSCR1L Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- GLTSCR1L Double-Nickase-Plasmid (h) und GLTSCR1L Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf GLTSCR1L abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
GLTSCR1L Double Nickase Plasmid (h) | sc-407155-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GLTSCR1L Double Nickase Plasmid (h2) | sc-407155-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GLTSCR1L (glioma tumor suppressor candidate region gene 1-like) kodiert ein nukleäres Protein, das an der Regulation chromatinassoziierter Prozesse beteiligt ist, die Transkriptionsprogramme und die Genomorganisation beeinflussen. Obwohl seine molekularen Partner noch nicht vollständig charakterisiert sind, stützen die verfügbaren Daten Funktionen in Signalwegen, die die epigenetische Regulation, die RNA-Prozessierung und die Aufrechterhaltung von Zellzuständen durch Modulation nukleärer Proteinkomplexe steuern. Veränderungen der GLTSCR1L-Expression wurden in krebsassoziierten Datensätzen beobachtet, was mit einer möglichen Beteiligung an der Kontrolle von Zellproliferation und Differenzierung vereinbar ist. Diese Eigenschaften machen GLTSCR1L zu einem nützlichen Ziel, um nukleäre Regulationsmechanismen zu untersuchen, die mit onkogenem Signaling und der Festlegung von Zelllinien in menschlichen Zellen verknüpft sind.
GLTSCR1L Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des GLTSCR1L-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von GLTSCR1L abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die GLTSCR1L-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit GLTSCR1L-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.