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GLP-1R双切口酶质粒(m) | sc-420581-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GLP-1R双切口酶质粒(m2) | sc-420581-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Glp1r 编码小鼠胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R),这是一种 B 类 GPCR,可响应肠促胰素激素,从而调控葡萄糖依赖性的胰岛素分泌以及更广泛的代谢稳态。配体结合后,GLP-1R 激活由 Gs 介导的 cAMP 生成及下游 PKA/EPAC 信号,影响胰岛中离子通道活性、囊泡胞吐以及转录程序,同时也作用于调控饱腹感与能量平衡的神经环路。GLP-1R 信号还与 PI3K/AKT 和 MAPK 通路发生交互,将营养感知与细胞存活及适应性反应联系起来。Glp1r 依赖性信号的失调与糖尿病、肥胖以及心脏代谢生理的实验模型相关,因此它是解析内分泌与神经内分泌代谢调控机制的有用靶点。
GLP-1R 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Glp1r 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Glp1r内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Glp1r的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Glp1r基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。