GIT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424063
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GIT2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GIT2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GIT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424063 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GIT2 (proteína ativadora de GTPase ARF com interação com quinases associadas a receptores acoplados à proteína G, ArfGAP 2) é uma proteína de ancoragem (scaffold) com atividade ArfGAP que coordena o tráfego de membranas e a remodelação do citoesqueleto ao integrar sinais de quinases associadas a GPCRs e de pequenas GTPases. Em células de camundongo, o GIT2 atua em complexos de sinalização de paxilina/PIX/PAK para regular a renovação das adesões focais, o espalhamento celular e a migração direcionada, acoplando esses processos à dinâmica da actina e à endocitose. Também contribui para a sinalização responsiva ao estresse e para a internalização de receptores, conectando redes de adesão e de sinalização que moldam as respostas celulares a estímulos ambientais. Vias associadas ao GIT2 desreguladas têm sido investigadas em contextos que envolvem motilidade alterada e sinalização inflamatória, apoiando sua relevância em estudos mecanísticos de remodelamento tecidual e de comportamento celular associado a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GIT2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Git2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Git2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Git2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GIT2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Git2 para a investigação da sinalização de GIT2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Git2 críticos para a função GIT2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Git2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GIT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo GIT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Git2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GIT2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR GIT2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Git2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Git2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.