Ggnbp2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-432161

Übersicht

Ggnbp2 (Gametogenetin-bindendes Protein 2) ist ein mit Keimzellen assoziiertes Protein, das mit der männlichen Reproduktionsbiologie in Verbindung gebracht wird. Berichtet wurde eine Anreicherung in Hodengeweben sowie ein Zusammenhang mit Prozessen der Spermatogenese. Obwohl seine molekularen Interaktionspartner bislang nicht vollständig charakterisiert sind, wird Ggnbp2 mit der Regulation transkriptioneller Programme und zellulärer Differenzierungszustände in der Keimbahn in Verbindung gebracht. Störungen von Genen, die in diesem Kontext aktiv sind, können die Chromatinorganisation, den Verlauf der Meiose und die Spermienentwicklung beeinflussen, was Ggnbp2 für die Untersuchung von Signal- und Regulationswegen, die der Fertilität und der Homöostase von Keimzellen zugrunde liegen, interessant macht. Veränderte Expressionsmuster hodenangereicherter Regulatoren wie Ggnbp2 werden außerdem im Zusammenhang mit abweichender Zellzykluskontrolle und fehlregulierter Differenzierung in krankheitsrelevanten Modellen untersucht.

Das Ggnbp2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Ggnbp2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Ggnbp2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Ggnbp2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Ggnbp2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Ggnbp2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Ggnbp2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Ggnbp2-Exone abzielen, die für die Ggnbp2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Ggnbp2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Ggnbp2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Ggnbp2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Ggnbp2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Ggnbp2 HDR-Plasmid (m) und Ggnbp2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Ggnbp2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Ggnbp2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.