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GDF-15双切口酶质粒(m) | sc-423881-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GDF-15双切口酶质粒(m2) | sc-423881-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Gdf15 编码生长分化因子 15(GDF-15),它是 TGF-β 超家族中的一种应激反应性细胞因子,可由细胞损伤、线粒体功能障碍以及炎症信号诱导表达。GDF-15 可通过与 SMAD 相关的通路传递信号,并以情境依赖的方式调节免疫细胞活性、代谢稳态和组织重塑。GDF-15 表达异常与心脏代谢应激表型、肿瘤相关炎症及神经退行性过程有关,因此可作为整合应激与炎症信号的有用分子读出。在实验模型中,GDF-15 常被研究为系统性应激反应的介质,以及连接炎症通路与能量平衡和细胞生存程序的关键节点。
GDF-15 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Gdf15 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Gdf15内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Gdf15的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Gdf15基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。