GBP4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405870

Übersicht

Guanylatbindendes Protein 4 (GBP4) ist eine durch Interferon induzierbare große GTPase, die an der zellintrinsischen Immunität nachgeschaltet an die Signalübertragung von Typ‑I‑ und Typ‑II‑Interferonen beteiligt ist. GBP4 wird mit angeborenen immunologischen Effektorprogrammen in Verbindung gebracht, die die Pathogenrestriktion, inflammatorische Signalgebung und antivirale Antworten modulieren, und ist funktionell mit JAK–STAT‑getriebenen Transkriptionsnetzwerken sowie Signalwegen interferon‑stimulierter Gene verknüpft. Indem GBP4 Aktivierungszustände von Immunzellen und zytokinregulierte Prozesse beeinflusst, werden Expression und Aktivität von GBP4 häufig im Kontext der Infektionsbiologie und immunassoziierter Pathophysiologie untersucht. Seine Rolle bei der Koordination GTPase‑abhängiger Reaktionen macht GBP4 zu einem nützlichen Knotenpunkt, um das stimulusabhängige Umgestalten zellulärer Abwehrprogramme zu untersuchen.

Das GBP4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des GBP4-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des GBP4-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von GBP4 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die GBP4-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von GBP4-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der GBP4-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf GBP4-Exone abzielen, die für die GBP4-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere GBP4-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom GBP4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom GBP4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des GBP4-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das GBP4 HDR-Plasmid (h) und GBP4 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von GBP4-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten GBP4-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.