GBP3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-402792

Übersicht

Guanylatbindendes Protein 3 (GBP3) ist eine in menschlichen Zellen durch Interferon induzierbare, große GTPase, die an Programmen der angeborenen Immunabwehr nachgeschaltet an die Typ‑I/II‑Interferon-Signalübertragung beteiligt ist. GBP3 trägt zu zellintrinsischen antimikrobiellen und antiviralen Antworten bei, indem es Netzwerke interferon-stimulierter Gene koordiniert und pathogeneinschränkende sowie entzündliche Prozesse reguliert, einschließlich Crosstalk mit Inflammasom-assoziierten Signalwegen. Veränderte GBP3-Expressionsmuster wurden mit Immunfehlregulation und entzündlichen Zuständen in Verbindung gebracht, und GBP3 wird häufig im Kontext der Infektionsbiologie und von Tumor–Immun-Interaktionen untersucht. Als Marker und Mediator interferongetriebener Signalgebung ist GBP3 relevant für die Analyse von Zytokinantworten, Wirt–Pathogen-Interaktionen und immunbezogenen Transkriptionsprogrammen.

Das GBP3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des GBP3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des GBP3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von GBP3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die GBP3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von GBP3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der GBP3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf GBP3-Exone abzielen, die für die GBP3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere GBP3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom GBP3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom GBP3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des GBP3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das GBP3 HDR-Plasmid (h) und GBP3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von GBP3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten GBP3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.