Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
GBP2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-402140
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GBP2 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico GBP2, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: GBP2 Antibody (G-9): sc-271568
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GBP2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-402140 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
La guanilato-binding protein 2 (GBP2) è una grande GTPasi inducibile dall’interferone implicata nella difesa cellula-intrinseca e nella segnalazione associata all’infiammazione. GBP2 si localizza in compartimenti citosolici e membranosi, dove partecipa alle reti di geni stimolati dall’interferone, alla regolazione di processi che limitano i patogeni e alla modulazione delle vie di segnalazione immunitaria. La sua attività collega l’attivazione dell’immunità innata a effetti a valle sulle risposte cellulari allo stress, sui programmi trascrizionali guidati dalle citochine e sul rimodellamento delle membrane intracellulari. Un’espressione deregolata di GBP2 e l’attivazione della via dell’interferone sono state associate a stati infiammatori e a fenotipi di immuno-oncologia, rendendo GBP2 un nodo utile per studi meccanicistici della risposta dell’ospite e della regolazione immunitaria.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO GBP2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene GBP2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del GBP2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto GBP2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina GBP2.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di GBP2 per lo studio della segnalazione di GBP2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni GBP2 critici per la funzione di GBP2
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di GBP2 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal GBP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal GBP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus GBP2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal GBP2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR GBP2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia GBP2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio GBP2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.