Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GBP1 Double Nickase Plasmid (h): sc-401778-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das GBP1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- GBP1 Double-Nickase-Plasmid (h) und GBP1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf GBP1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: GBP1: sc-53857
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
GBP1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401778-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GBP1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401778-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Humanes GBP1 (Guanylat-bindendes Protein 1) ist eine durch Interferon induzierbare große GTPase, die an intrazellulären Membranen und in pathogenenhaltigen Vakuolen lokalisiert und dort die zellautonome Immunität unterstützt. GBP1 ist an IFN-γ-gesteuerten Programmen, der angeborenen Immun-Signalübertragung und der antimikrobiellen Restriktion beteiligt – vermittelt durch GTP-abhängige Oligomerisierung und die Rekrutierung nachgeschalteter Effektormechanismen. Seine Aktivität überschneidet sich mit Signalwegen, die die Inflammasom-Regulation, Zytokinantworten und die Abwehrfunktion epithelialer Barrieren steuern, wodurch GBP1 ein hilfreicher Knotenpunkt für die Untersuchung von Wirt–Pathogen-Interaktionen und der Verschaltung entzündlicher Netzwerke ist. Dysregulierte Interferon/GBP1-Signaturen wurden in zahlreichen entzündlichen und infektiösen Krankheitskontexten beschrieben und werden häufig in Tumormikroumgebungen beobachtet, was die Forschung zu immunvermittelten Stressantworten und krebsassoziierter Entzündung unterstützt.
GBP1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des GBP1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von GBP1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die GBP1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit GBP1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.