Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
GBP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401778
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- GBP1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico GBP1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GBP1 Anticuerpo (1B1): sc-53857
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
GBP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401778 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
La proteína 1 de unión a guanilato (GBP1) es una GTPasa grande inducible por interferón, similar a la dinamina, que actúa como efector de la inmunidad innata. Se sobreexpresa de forma marcada aguas abajo de la señalización JAK/STAT en respuesta a interferones de tipo I y tipo II, y participa en la defensa celular autónoma al dirigirse a compartimentos que contienen patógenos y al modular programas antimicrobianos e inflamatorios. GBP1 se ha relacionado con procesos como respuestas asociadas al inflamasoma, el tráfico intracelular y la remodelación del citoesqueleto, con funciones dependientes del contexto en la biología de la barrera epitelial y la activación de células inmunitarias. La expresión alterada de GBP1 se observa con frecuencia en estados inflamatorios crónicos, modelos de enfermedades infecciosas y microambientes inmunitarios asociados a tumores, lo que la convierte en un nodo útil para estudiar redes de genes estimulados por interferón (ISG).
El plásmido CRISPR/Cas9 KO GBP1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GBP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GBP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GBP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GBP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GBP1 para la investigación de la señalización de GBP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de GBP1 críticos para la función de GBP1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GBP1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido GBP1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GBP1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GBP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GBP1 (h) y el plásmido HDR GBP1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GBP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GBP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.