gasdermin C Double Nickase Plasmid (h): sc-412690-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das gasdermin C Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- gasdermin C Double-Nickase-Plasmid (h) und gasdermin C Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf GSDMC abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
gasdermin C Double Nickase Plasmid (h) | sc-412690-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
gasdermin C Double Nickase Plasmid (h2) | sc-412690-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane GSDMC-Gen kodiert Gasdermin C, ein Mitglied der Gasdermin-Familie, das nach proteolytischer Aktivierung durch porenbildende Aktivität an regulierten Zelltodprogrammen und entzündlicher Signalübertragung beteiligt ist. Gasdermin C steht im Zusammenhang mit der Epithelbiologie und kann in Signalwege eingreifen, die Membranintegrität, Zytokinfreisetzung und Stressantworten steuern und damit die Gewebehomöostase prägen. Eine veränderte GSDMC-Expression wurde in mehreren Malignomen sowie in entzündlichen Kontexten beschrieben, was seine Nutzung als mechanistischen Knotenpunkt für die Untersuchung unterstützt, wie Zelltodprogramme Tumorprogression und Signale in der Mikroumgebung beeinflussen. Als nachgeschalteter Effektor proteasegetriebener Ereignisse liefert Gasdermin C einen gut handhabbaren Readout zur Analyse pyroptoseähnlicher Prozesse und barriereassoziierter Entzündungen in humanen Zellmodellen.
gasdermin C Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des GSDMC-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von GSDMC abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die GSDMC-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit GSDMC-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.