gasdermin C CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-429915

Übersicht

Maus-Gsdmc kodiert Gasdermin C, ein Mitglied der Gasdermin-Familie, das mit reguliertem Zelltod und entzündlicher Membranpermeabilisierung nachgeschaltet zur Proteaseaktivierung in Verbindung gebracht wird. Gasdermine können als Effektoren pyroptoseähnlicher Prozesse wirken, indem sie Poren in der Plasmamembran bilden und dadurch die Zytokinfreisetzung, die Integrität epithelialer Barrieren und die angeborene Immun-Signalgebung beeinflussen. Die Gsdmc-Expression ist in epithelialen Kontexten angereichert und wurde mit Stressantworten verknüpft, die sich mit NF-κB-getriebener Entzündung und Programmen des Gewebe-Remodelings überschneiden. Eine dysregulierte Gasdermin-Aktivität ist daher für die Untersuchung entzündlicher Pathologien, Wirt–Mikroben-Interaktionen und krebsassoziierter Zelltod-Phänotypen in murinen Modellen relevant.

Das gasdermin C CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Gsdmc-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Gsdmc-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Gsdmc nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die gasdermin C-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Gsdmc-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der gasdermin C-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Gsdmc-Exone abzielen, die für die gasdermin C-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Gsdmc-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom gasdermin C CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom gasdermin C CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Gsdmc-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das gasdermin C HDR-Plasmid (m) und gasdermin C HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Gsdmc-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Gsdmc-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.