Gas6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400978

概要

増殖停止特異的6（GAS6）遺伝子は、TAM受容体型チロシンキナーゼであるAXL、MERTK、TYRO3のビタミンK依存性の分泌性リガンドGas6をコードしている。Gas6–TAMシグナル伝達は、エフェロサイトーシス、自然免疫応答の抑制、細胞生存、遊走を調節し、PI3K–AKT、MAPK/ERK、NF-κBなどを含むことの多い経路を介して作用する。特に、マクロファージの分極化と血管内皮の恒常性に強い影響を及ぼす。ヒト組織においてGAS6の活性は、血栓形成と炎症のクロストークに関与し、AXL/MERTK依存的なプログラムを介して腫瘍—免疫相互作用や転移挙動を再構築し得る。GAS6/TAM軸シグナルの破綻は、がんの進行、慢性炎症、線維化、血管病態と関連づけられており、微小環境シグナルの機構研究で頻繁に標的とされている。

Gas6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGAS6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GAS6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GAS6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Gas6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Gas6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GAS6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Gas6の機能に不可欠なGAS6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GAS6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Gas6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGas6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GAS6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Gas6 HDRプラスミド（h）および Gas6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGAS6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGAS6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。