Plasmide Double Nickase (m) gametogenetin: sc-434015-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) gametogenetin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide gametogenetin Double Nickase (m) et le plasmide gametogenetin Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ggn. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) gametogenetin | sc-434015-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Ggn** code la gamétogénétine, une protéine enrichie dans les cellules germinales, impliquée dans la spermatogenèse et la différenciation tardive des gamètes, avec une expression marquée dans le testicule. La gamétogénétine a été associée à des événements d’organisation nucléaire et cytosquelettique qui accompagnent la progression de la méiose et la spermiogenèse, notamment le remodelage de la chromatine et la maturation structurelle des spermatozoïdes en développement. La perturbation de **Ggn** est donc pertinente pour étudier les voies qui régissent le développement des cellules germinales, l’intégrité du génome au cours de la méiose et les phénotypes liés à la fertilité. Ces processus s’inscrivent dans des aspects plus larges de la biologie de la reproduction et de programmes développementaux, souvent altérés dans des modèles d’infertilité masculine et de dysfonction testiculaire.
gametogenetin Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ggn dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ggn. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ggn. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ggn.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.