GALR3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406303

Übersicht

GALR3 kodiert den Galaninrezeptor 3, einen GPCR der Klasse A, der das Neuropeptid Galanin und verwandte Liganden bindet, um die neuronale Erregbarkeit und die neuroendokrine Signalübertragung zu modulieren. Nach Aktivierung koppelt GALR3 hauptsächlich an inhibitorische G-Proteine und beeinflusst dadurch die Adenylylcyclase-Aktivität, die Regulation von Ionenkanälen sowie nachgeschaltete, MAPK-gekoppelte Signalnetzwerke; auf diese Weise werden Neurotransmitterfreisetzung und stressresponsive Schaltkreise mitgeprägt. Die Expression von GALR3 im zentralen Nervensystem und in peripheren Geweben verbindet den Rezeptor mit Signalwegen, die Stimmung, Nozizeption, Fütterungsverhalten und autonome Regulation steuern. Veränderte Galanin–Rezeptor-Signalgebung, einschließlich Änderungen der GALR3-Expression oder -Aktivität, wurde im Zusammenhang mit neuropsychiatrischen und neurologischen Phänotypen sowie in breiter angelegten Studien zur GPCR-vermittelten Signaltransduktion untersucht.

Das GALR3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des GALR3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des GALR3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von GALR3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die GALR3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von GALR3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der GALR3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf GALR3-Exone abzielen, die für die GALR3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere GALR3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom GALR3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom GALR3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des GALR3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das GALR3 HDR-Plasmid (h) und GALR3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von GALR3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten GALR3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.