galectin-9 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421420

Übersicht

Das Mausgen **Lgals9** kodiert **Galectin-9**, ein β-Galactosid-bindendes Lektin, das glykanabhängige Zell-Zell- und Zell-Matrix-Interaktionen vermittelt und Immun- sowie Entzündungssignale mitprägt. Galectin-9 moduliert die Aktivierung, Adhäsion und das Trafficking von Leukozyten und ist mit Signalwegen verknüpft, die Zytokinantworten, die Regulation von T-Zellen und die Polarisierung myeloider Zellen steuern. Aufgrund seiner Funktionen in der Immunregulation und Gewebehomöostase wird **Lgals9** häufig in Modellen zu Autoimmunität, Infektionen, Allergien und Tumorimmunologie untersucht, ebenso in Zusammenhängen von Fibrose und chronischer Entzündung. Eine veränderte Galectin-9-Expression wurde außerdem mit Veränderungen der Apoptoseanfälligkeit und von Stressantworten in Verbindung gebracht, die krankheitsrelevante Mikroumgebungen beeinflussen.

Das galectin-9 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Lgals9-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Lgals9-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Lgals9 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die galectin-9-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Lgals9-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der galectin-9-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Lgals9-Exone abzielen, die für die galectin-9-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Lgals9-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom galectin-9 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom galectin-9 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Lgals9-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das galectin-9 HDR-Plasmid (m) und galectin-9 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Lgals9-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Lgals9-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.