galectin-7 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-421419

Panoramica

Il gene murino **Lgals7** codifica la galectina-7, una lectina legante i β-galattosidi arricchita negli epiteli stratificati, che regola le interazioni cellula–cellula e cellula–matrice attraverso il riconoscimento dei glicani. La galectina-7 è stata collegata al controllo della proliferazione e della differenziazione dei cheratinociti, all’omeostasi della barriera epiteliale e alle risposte allo stress, con ruoli riportati nella modulazione dell’apoptosi e della segnalazione infiammatoria. Attraverso i suoi effetti sull’adesione e sui programmi di riparazione delle ferite, **Lgals7** è rilevante per studi di biologia cutanea, rimodellamento epiteliale e fenotipi associati ai tumori come migrazione e invasione. Un’espressione deregolata della galectina-7 è stata associata a patologie infiammatorie della pelle e a tumori epiteliali, supportandone l’uso come nodo meccanicistico nella ricerca orientata a vie di segnalazione e biomarcatori.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO galectin-7 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Lgals7 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Lgals7 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Lgals7 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina galectin-7.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Lgals7 per lo studio della segnalazione di galectin-7, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Lgals7 critici per la funzione di galectin-7
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Lgals7 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal galectin-7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal galectin-7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Lgals7. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal galectin-7 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR galectin-7 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Lgals7 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Lgals7 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.