GABAC Rρ2 Double Nickase Plasmid (h): sc-404955-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das GABAC Rρ2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- GABAC Rρ2 Double-Nickase-Plasmid (h) und GABAC Rρ2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf GABRR2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
GABAC Rρ2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-404955-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GABAC Rρ2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-404955-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRR2 kodiert den menschlichen GABA\(_C\)-Rezeptor rho2 (GABA\(_C\) Rρ2), einen ligandengesteuerten Chloridkanal aus der Familie der Cys-Loop-Rezeptoren, der hemmende Neurotransmission vermittelt. Nach Bindung von GABA leiten rho2-haltige Rezeptoren Cl⁻-Ionen und beeinflussen so die Membran-Erregbarkeit und die synaptische Signalübertragung; dadurch werden die Aktivität neuronaler Schaltkreise und die Informationsverarbeitung in Nervenzellen mitgeprägt. Die Funktion von GABA\(_C\) Rρ2 ist in umfassendere GABAerge Signalwege eingebettet, die das Gleichgewicht zwischen Erregung und Hemmung sowie aktivitätsabhängige Netzwerkzustände regulieren. Eine Fehlregulation hemmender Signalübertragung und veränderte Expressionsmuster von Rezeptoruntereinheiten werden im Kontext neurologischer und neuropsychiatrischer Krankheitsmechanismen untersucht und stützen die laufende Erforschung von GABRR2 in Gehirnfunktion und -dysfunktion.
GABAC Rρ2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des GABRR2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von GABRR2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die GABRR2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit GABRR2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.