Plasmide Double Nickase (h) GABAA Rγ2: sc-402057-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GABAA Rγ2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GABAA Rγ2 Double Nickase (h) et le plasmide GABAA Rγ2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GABRG2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GABAA Rγ2 | sc-402057-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GABAA Rγ2 | sc-402057-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRG2 code la sous-unité γ2 du récepteur humain GABA\_A, un canal chlorure ligand-dépendant qui assure une transmission synaptique inhibitrice rapide dans le système nerveux central. L’incorporation de γ2 influence l’assemblage du récepteur, son regroupement synaptique via la géphyrine et sa sensibilité pharmacologique, modulant ainsi l’excitabilité neuronale et les oscillations des réseaux. La signalisation des récepteurs GABA\_A s’articule avec les voies de plasticité synaptique dépendante de l’activité et avec les programmes d’équilibre excitation–inhibition, essentiels au développement des circuits et à l’homéostasie. Des perturbations génétiques et fonctionnelles de GABRG2 ont été associées à des phénotypes neurodéveloppementaux et liés aux crises, ce qui étaye sa pertinence pour des études mécanistiques de la neurotransmission inhibitrice.
GABAA Rγ2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GABRG2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GABRG2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GABRG2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GABRG2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.