Plásmido Doble Nickase (h) GABAA Rγ1: sc-405161-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GABAA Rγ1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GABAA Rγ1 (h) y el plásmido de doble nickasa GABAA Rγ1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GABRG1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GABAA Rγ1 | sc-405161-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GABAA Rγ1 | sc-405161-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRG1 codifica la subunidad γ1 humana del receptor GABA\(_A\), un canal de cloruro pentamérico activado por ligando que media la neurotransmisión inhibidora rápida en el sistema nervioso central. La incorporación de subunidades γ influye en el ensamblaje del receptor, su localización sináptica, la cinética de apertura/cierre y las propiedades farmacológicas, modulando así la excitabilidad neuronal y las oscilaciones de las redes neuronales. La señalización del receptor GABA\(_A\) se integra con procesos dependientes de la actividad, como la plasticidad sináptica y el equilibrio entre excitación e inhibición, a través de la homeostasis del cloruro y la modulación posterior del potencial de membrana. Las alteraciones de la señalización GABAérgica se han implicado en fenotipos neuropsiquiátricos y relacionados con crisis epilépticas, lo que respalda a GABRG1 como una diana para estudios mecanísticos de la función de los circuitos inhibidores.
GABAA Rγ1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GABRG1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GABRG1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GABRG1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GABRG1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.