Plasmide Double Nickase (h) GABAA Rα3: sc-403044-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GABAA Rα3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GABAA Rα3 Double Nickase (h) et le plasmide GABAA Rα3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GABRA3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GABAA Rα3 | sc-403044-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GABAA Rα3 | sc-403044-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRA3 code la sous-unité α3 du récepteur humain de type A de l’acide γ‑aminobutyrique (GABAA Rα3), un composant de canal chlorure activé par ligand qui assure une neurotransmission inhibitrice rapide dans le système nerveux central. L’incorporation de la sous-unité α3 dans les récepteurs GABAA pentamériques influence la cinétique du canal, la signalisation synaptique par rapport à l’extrasynaptique, ainsi que l’excitabilité neuronale via la conductance au chlorure et la régulation du potentiel de membrane. La signalisation GABAergique via les récepteurs GABAA s’intègre à des voies de modulation dépendante de la phosphorylation, de trafic des récepteurs et d’organisation synaptique, qui façonnent les oscillations des réseaux et la formation des circuits au cours du développement. Une expression ou une fonction altérée des sous-unités des récepteurs GABAA, dont GABRA3, est étudiée dans le cadre de phénotypes neurodéveloppementaux et neuropsychiatriques, ainsi que de mécanismes liés aux crises épileptiques.
GABAA Rα3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GABRA3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GABRA3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GABRA3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GABRA3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.