Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GABAA Rα2 Double Nickase Plasmid (h): sc-402715-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das GABAA Rα2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- GABAA Rα2 Double-Nickase-Plasmid (h) und GABAA Rα2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf GABRA2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
GABAA Rα2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402715-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GABAA Rα2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402715-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRA2 kodiert die humane GABA\(_A\)-Rezeptor‑Untereinheit α2, eine zentrale Komponente pentamerer, ligandengesteuerter Chloridkanäle, die die schnelle inhibitorische Neurotransmission im zentralen Nervensystem vermitteln. Durch die Beeinflussung der Chloridleitfähigkeit wirkt GABA\(_A\)Rα2 auf die neuronale Erregbarkeit, die synaptische Integration und Netzwerkoszillationen und ist damit mit aktivitätsabhängiger Schaltkreisfunktion sowie der Erregungs‑/Hemmungsbalance verknüpft. Diese Rezeptoruntereinheit beteiligt sich an der Signalübertragung an GABAergen Synapsen und interagiert mit Gerüst‑ und Transport-/Trafficking‑Maschinerien, die die Rezeptorlokalisation und Desensibilisierung steuern. Genetische und regulatorische Variation in GABRA2 wurde mit neuropsychiatrischen und neurologischen Phänotypen in Verbindung gebracht, was seine Relevanz für mechanistische Studien in neuronalen Modellen unterstreicht.
GABAA Rα2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des GABRA2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von GABRA2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die GABRA2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit GABRA2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.