Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
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GABAA Rα2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402715
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- GABAA Rα2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico GABAA Rα2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
GABAA Rα2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402715 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
GABRA2 codifica la subunidad α2 del receptor humano GABA\(_A\), un canal de cloruro pentamérico activado por ligando que media la neurotransmisión inhibitoria rápida en el sistema nervioso central. Los receptores que contienen GABA\(_A\) Rα2 modulan la inhibición sináptica, la excitabilidad neuronal y las oscilaciones de red al acoplar la unión de GABA al flujo de cloruro y a la hiperpolarización de la membrana. Esta subunidad contribuye al ensamblaje del receptor, su tráfico y su localización sináptica, integrándose con procesos de señalización que regulan la homeostasis iónica y la plasticidad dependiente de la actividad. Las alteraciones genéticas y funcionales de GABRA2 se han asociado con fenotipos neuropsiquiátricos y relacionados con convulsiones, lo que respalda su relevancia para estudios mecanísticos de la disfunción de los circuitos inhibitorios.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO GABAA Rα2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GABRA2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GABRA2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GABRA2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GABAA Rα2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GABRA2 para la investigación de la señalización de GABAA Rα2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de GABRA2 críticos para la función de GABAA Rα2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GABRA2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido GABAA Rα2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GABAA Rα2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GABRA2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GABAA Rα2 (h) y el plásmido HDR GABAA Rα2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GABRA2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GABRA2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.