Plasmide Double Nickase (h) Gab 2: sc-402159-NIC

Le gène humain **GAB2** code la protéine adaptatrice d’échafaudage **Gab2**, une plateforme d’ancrage qui couple les récepteurs à activité tyrosine kinase activés et les récepteurs de cytokines à des enzymes de signalisation situées en aval. Grâce au recrutement, dépendant de la phosphorylation, de **SHP2**, de **PI3K (p85)** et d’autres effecteurs, Gab2 contribue à propager la signalisation des voies **PI3K–AKT** et **RAS–ERK/MAPK**, qui régulent la prolifération, la survie, la migration et la différenciation. Gab2 interfère également avec la signalisation des récepteurs immunitaires et les réponses aux facteurs de croissance hématopoïétiques, influençant les états d’activation cellulaire et les choix de lignée. Une signalisation GAB2 dérégulée ou une expression altérée a été associée à des réseaux de signalisation oncogéniques et à des phénotypes inflammatoires, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques du remodelage des voies et de l’intégration des signaux.

Gab 2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GAB2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GAB2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GAB2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GAB2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.