Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO G9a (m): sc-430994
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- G9a Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique G9a, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: G9a Antibody (C-9): sc-515726
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO G9a (m) | sc-430994 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin *Ehmt2* code la méthyltransférase des lysines d’histones G9a, l’un des principaux enzymes responsables de la mono- et diméthylation de H3K9, qui contribue à établir des états de chromatine répressifs au sein de l’euchromatine. G9a coordonne des programmes de silencing transcriptionnel impliqués dans le développement embryonnaire, l’engagement de lignée et le maintien de l’identité cellulaire, en s’associant à des régulateurs de la chromatine tels que GLP (EHMT1) et des facteurs associés à l’hétérochromatine. Par ses effets sur l’accessibilité de la chromatine et l’expression génique, EHMT2 influence les réponses aux dommages de l’ADN, le calendrier de réplication et la stabilité épigénétique. Une activité de G9a dérégulée et des profils altérés de H3K9me2 sont largement étudiés dans le contexte de la biologie tumorale, de phénotypes neurodéveloppementaux et de la régulation des gènes inflammatoires, faisant de *Ehmt2* un nœud clé pour la recherche axée sur l’épigénétique.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO G9a (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Ehmt2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Ehmt2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Ehmt2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine G9a.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Ehmt2 pour l'étude de la signalisation de G9a, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Ehmt2 essentiels à la fonction de G9a
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Ehmt2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le G9a plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le G9a plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Ehmt2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le G9a plasmide HDR (m) et le G9a (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Ehmt2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Ehmt2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.