G530011O06Rik CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-437289

Übersicht

Das Mausgen **G530011O06Rik** kodiert ein weitgehend uncharakterisiertes Protein mit nur begrenzter funktioneller Annotation und stellt damit ein geeignetes Ziel für entdeckungsorientierte Studien zur Genregulation und zellulären Homöostase dar. Vorliegende Hinweise aus dem genomischen Kontext und aus Expressionsprofilen deuten – abhängig von Zelltyp und Entwicklungsstadium – auf mögliche Rollen in grundlegenden Prozessen wie der transkriptionellen Kontrolle, dem RNA-Stoffwechsel oder der intrazellulären Signalübertragung hin. Da viele RIKEN-cDNA-Gene auf konservierte Säuger-Loci kartieren, kann eine Perturbation von **G530011O06Rik** dazu beitragen zu klären, wie schlecht annotierte Proteine zur Architektur von Signalwegen und zu Phänotypen beitragen. Eine systematische Loss-of-Function-Analyse kann hilfreich sein, um Verknüpfungen zu Stressantworten, Differenzierungsprogrammen oder krankheitsrelevanten molekularen Signaturen in Mausmodellsystemen zu identifizieren.

Das G530011O06Rik CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des G530011O06Rik-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des G530011O06Rik-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von G530011O06Rik nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die G530011O06Rik-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von G530011O06Rik-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der G530011O06Rik-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf G530011O06Rik-Exone abzielen, die für die G530011O06Rik-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere G530011O06Rik-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom G530011O06Rik CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom G530011O06Rik CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des G530011O06Rik-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das G530011O06Rik HDR-Plasmid (m) und G530011O06Rik HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von G530011O06Rik-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten G530011O06Rik-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.