G3BP2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-403630-LAC

G3BP2 (G3BP-Stressgranula-Assemblierungsfaktor 2) ist ein RNA-bindendes Protein, das als zentrales Gerüst für die Nukleation von Stressgranula und die Sortierung (Triagierung) von mRNAs fungiert und während zellulären Stresses Transkriptstabilität und Translation koordiniert. Es ist an posttranskriptionellen Regulationsnetzwerken beteiligt, die mit Interferon-Signalgebung, angeborenen Immunantworten sowie der Anpassung an oxidativen Stress und Stress des endoplasmatischen Retikulums verknüpft sind, mit nachgelagerten Auswirkungen auf Zellzyklusprogression und Überlebenssignalwege. Durch Interaktionen mit Komponenten der Signalübertragung und des RNA-Stoffwechsels trägt G3BP2 dazu bei, Umweltreize mit Ribonukleoprotein-Remodelling und translationaler Kontrolle zu koppeln. Eine Fehlregulation der Stressgranula-Dynamik und der RNA-Homöostase unter Beteiligung von G3BP2 wurde mit krankheitsrelevanten Prozessen in Verbindung gebracht, darunter Stresstoleranz von Tumorzellen, neurodegenerationsassoziierte Protein-/RNA-Aggregation und inflammatorische Signalgebung.

G3BP2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente G3BP2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

G3BP2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der G3BP2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen G3BP2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen G3BP2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.