G1P3 Double Nickase Plasmid (h): sc-403682-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das G1P3 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- G1P3 Double-Nickase-Plasmid (h) und G1P3 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IFI6 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
G1P3 Double Nickase Plasmid (h) | sc-403682-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
G1P3 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403682-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane Gen **IFI6** kodiert das interferon-α‑induzierbare Protein **G1P3**, einen kleinen membranassoziierten Faktor, der nachgeschaltet zur Typ‑I‑Interferon-Signalgebung über den **JAK–STAT**-Signalweg induziert wird. **G1P3** wird mit der Modulation der mitochondrialen Integrität und zellulärer Überlebensprogramme in Verbindung gebracht; beschrieben sind Effekte auf die Apoptose-Empfindlichkeit und zelluläre Stressantworten. Als interferon-stimuliertes Gen trägt **IFI6** zur Regulation des angeborenen Immunzustands sowie zu Transkriptionsprogrammen bei, die antivirale Abwehrmechanismen und entzündliche Signalnetzwerke umgestalten. Eine dysregulierte **IFI6**-Expression wurde in mehreren Krankheitskontexten mit chronischer Interferonaktivität beobachtet, darunter entzündliche Erkrankungen und Krebserkrankungen, was es zu einem nützlichen Knotenpunkt für mechanistische Studien interferongetriebener Phänotypen macht.
G1P3 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IFI6-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IFI6 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IFI6-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IFI6-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.