FUT2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-409559

概要

FUT2はα(1,2)-フコース転移酵素2をコードしており、ゴルジ体に局在する糖転移酵素として、糖鎖の末端フコシル化を触媒し、粘膜上皮表面および分泌物中にHタイプ1/2抗原を生成します。FUT2は、糖タンパク質や糖脂質上のフコシル化糖鎖モチーフを制御することで、タンパク質輸送、上皮バリア機能、ならびに腸管および気道粘膜における宿主—微生物相互作用に影響を及ぼします。遺伝的変異やFUT2活性の変化は、シークレター（分泌型）ステータスと関連し、粘膜の糖鎖修飾パターンの差異をもたらします。これらの差異は、感染性および炎症性の表現型に対する感受性との相関が示されています。糖鎖依存的な認識イベントの主要な調節因子として、FUT2はグライコミクス、マイクロバイオーム研究、上皮免疫学の分野で広く研究されています。

FUT2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFUT2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FUT2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FUT2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FUT2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FUT2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FUT2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FUT2の機能に不可欠なFUT2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FUT2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FUT2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFUT2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FUT2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FUT2 HDRプラスミド（h）および FUT2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFUT2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFUT2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。