FUNDC1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-403031-LAC

FUNDC1 (FUN14-Domäne enthaltend 1) kodiert einen Rezeptor der äußeren Mitochondrienmembran, der eine hypoxie-abhängige Mitophagie vermittelt, indem er über sein LIR-Motiv an LC3 bindet und die selektive Entfernung geschädigter Mitochondrien koordiniert. Die Aktivität von FUNDC1 wird durch phosphorylierungsabhängige Signalwege reguliert und ist mit Pfaden verknüpft, die die mitochondriale Dynamik, die Bioenergetik und die Homöostase reaktiver Sauerstoffspezies steuern. Aufgrund seiner Rolle in der mitochondrialen Qualitätskontrolle wurde FUNDC1 im Kontext zellulärer Stressanpassung und inflammatorischer Signalübertragung untersucht; es wurden Zusammenhänge mit kardiometabolischer Dysfunktion, neurodegenerativen Prozessen und krebsassoziiertem metabolischem Remodeling beschrieben. Die Modulation der FUNDC1-Expression stellt einen praktikablen Ansatz dar, um zu untersuchen, wie Mitophagie und mitochondrialer Turnover Zellschicksalsentscheidungen unter Hypoxie und anderen Stressoren beeinflussen.

FUNDC1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente FUNDC1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

FUNDC1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der FUNDC1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen FUNDC1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen FUNDC1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.