Plásmido Doble Nickase (h) FTSJD2: sc-409236-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FTSJD2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FTSJD2 (h) y el plásmido de doble nickasa FTSJD2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CMTR1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FTSJD2 | sc-409236-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FTSJD2 | sc-409236-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CMTR1 (también conocido como FTSJD2) codifica una metiltransferasa específica del cap 2′-O de la ribosa que cataliza la formación de la estructura cap1 del ARNm en transcritos de la ARN polimerasa II. Esta modificación favorece un procesamiento eficiente del pre-ARNm, la traducción y la estabilidad del transcrito, y ayuda a moldear la discriminación inmunitaria innata entre ARN propio y no propio a través de vías de detección de ARN vinculadas al interferón. La actividad de CMTR1 se integra con programas más amplios del metabolismo del ARN que influyen en la homeostasis de la expresión génica en células humanas. La desregulación de la maquinaria de metilación del cap, incluidos los pasos dependientes de CMTR1, se estudia en el contexto de alteraciones de la señalización por interferón, las respuestas antivirales y la reprogramación transcripcional asociada al cáncer.
FTSJD2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CMTR1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CMTR1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CMTR1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CMTR1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.