FOXP3 Lentiviral Activation Particles (m): sc-422896-LAC

Foxp3 kodiert FOXP3, einen Transkriptionsfaktor der Forkhead-Familie, der bei der Maus als Masterregulator für die Festlegung der regulatorischen T‑Zell( Treg)-Linie und deren suppressive Aktivität fungiert. FOXP3 koordiniert transkriptionelle Netzwerke, die die Immuntoleranz steuern, einschließlich der Modulation der IL‑2-Signalübertragung, TCR‑getriebener Aktivierungsprogramme sowie der Expression von Zytokinen und Chemokinen, die Lymphozyten-Trafficking und Effektor-Differenzierung prägen. Über diese Signalwege trägt FOXP3 zur Aufrechterhaltung der peripheren Homöostase bei und begrenzt pathogene Entzündungen, wodurch es einen zentralen Knotenpunkt für die Untersuchung von Mechanismen der Autoimmunität, Allergie und immunvermittelten Gewebeschädigung darstellt. Eine dysregulierte Foxp3-Expression oder -Funktion wird daher häufig als molekularer Ansatzpunkt genutzt, um den Verlust von Toleranz und Entscheidungen über T‑Zell-Schicksale in experimentellen Krankheitsmodellen zu untersuchen.

FOXP3 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Foxp3-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

FOXP3 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Foxp3-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen FOXP3-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Foxp3-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.