Plasmide Double Nickase (h) FOXF1: sc-403521-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FOXF1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FOXF1 Double Nickase (h) et le plasmide FOXF1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FOXF1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FOXF1 | sc-403521-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FOXF1 | sc-403521-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXF1 (Forkhead box F1) code un facteur de transcription de la famille Forkhead qui régule la différenciation mésenchymateuse, le développement vasculaire et la signalisation épithélio-mésenchymateuse au cours de l’organogenèse. Dans les cellules humaines, FOXF1 influence des programmes transcriptionnels qui contrôlent le remodelage de la matrice extracellulaire, la migration cellulaire et l’expression de gènes angiogéniques, en s’intégrant à des réseaux de signalisation du développement tels que les voies Hedgehog, WNT et TGF-β/SMAD. Une altération du dosage de FOXF1 ou une perturbation de sa régulation a été associée à des anomalies congénitales pulmonaires et vasculaires, ainsi qu’à un dérèglement des programmes stromaux en biologie des cancers. En tant que régulateur de la lignée cellulaire et du microenvironnement, FOXF1 est fréquemment étudié dans des modèles de mésenchyme pulmonaire, d’interactions endothélio-stromales et de contrôle transcriptionnel du développement.
FOXF1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FOXF1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FOXF1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FOXF1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FOXF1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.