FMNL3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406244

개요

FMNL3(formin-like protein 3)는 Rho GTPase에 의해 조절되는 액틴 핵형성 및 신장 인자로, 세포 피질(cortical) 액틴 세포골격의 리모델링을 조율합니다. 필로포디아와 라멜리포디아 형성을 지원하고 세포 극성을 조절하며, CDC42/RAC 신호 및 세포골격 역학과 연계된 경로를 통해 방향성 이동에 기여합니다. FMNL3 활성은 액틴 조립에 의존하는 막 돌출, 부착(adhesion) 턴오버, 그리고 세포내 수송 과정에도 영향을 미칩니다. FMNL3 발현 또는 신호전달의 이상 조절은 여러 모델 시스템에서 종양세포 침윤과 전이에 관련된 표현형과 연관되어 보고되었으며, 이는 FMNL3를 세포 운동성과 세포골격 제어의 기전 연구에 유용한 표적으로 만듭니다.

FMNL3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 FMNL3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 FMNL3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 FMNL3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FMNL3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FMNL3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 FMNL3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FMNL3 기능에 중요한 FMNL3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 FMNL3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FMNL3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 FMNL3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 FMNL3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FMNL3 HDR 플라스미드 (h) 및 FMNL3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 FMNL3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 FMNL3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.