Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Flotillin-2 Double Nickase Plasmid (h): sc-401200-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Flotillin-2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Flotillin-2 Double-Nickase-Plasmid (h) und Flotillin-2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf FLOT2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Flotillin-2: sc-28320
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Flotillin-2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401200-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Flotillin-2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401200-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FLOT2 kodiert Flotillin-2, ein membranassoziiertes Gerüstprotein, das in Lipid Rafts und caveolae-ähnlichen Mikrodomänen angereichert ist und Rezeptor‑Signalkomplexe organisiert sowie Endozytose, Membrantransport und die Dynamik des Aktinzytoskeletts reguliert. Flotillin-2 ist an Prozessen wie der clathrinunabhängigen Internalisierung, der Signalweiterleitung von Wachstumsfaktor‑Rezeptoren und der räumlichen Steuerung der Aktivität der MAPK/ERK‑ und PI3K–AKT‑Signalwege beteiligt. Über seine Rolle in der Organisation von Plasmamembran‑Mikrodomänen und im vesikulären Transport beeinflusst FLOT2 Programme der Zelladhäsion, Migration und Proliferation, die für Tumorbiologie, Immunsignalgebung und Neurobiologie relevant sind. Eine veränderte Expression oder Lokalisation von Flotillin-2 wurde mit Änderungen des invasiven Verhaltens und der Stressantwort‑Signalgebung in Verbindung gebracht, was seine Nutzung als mechanistischer Knotenpunkt in Studien zu onkogener Signalgebung und Membranorganisation unterstützt.
Flotillin-2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des FLOT2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von FLOT2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die FLOT2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit FLOT2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.