Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FKBP8 Double Nickase Plasmid (h): sc-403075-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das FKBP8 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- FKBP8 Double-Nickase-Plasmid (h) und FKBP8 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf FKBP8 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: FKBP8: sc-166607
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
FKBP8 Double Nickase Plasmid (h) | sc-403075-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FKBP8 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403075-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FKBP8 kodiert das FK506-bindende Protein 8 (FKBP38), ein membranverankertes Immunophilin, das hauptsächlich an Kontaktstellen zwischen Mitochondrien und endoplasmatischem Retikulum lokalisiert. Es wirkt als Peptidyl-Prolyl-cis-trans-Isomerase und molekulares Chaperon, das Proteinfaltung und -stabilität moduliert und zugleich über Interaktionen mit Mitgliedern der BCL2-Familie antiapoptotische Signalwege beeinflusst. FKBP8 ist an der mitochondrialen Qualitätskontrolle sowie an autophagiebezogenen Prozessen beteiligt und verknüpft damit die Homöostase von Organellen mit zellulären Stressantworten. Eine dysregulierte Expression oder Funktion von FKBP8 wurde mit veränderter Proteostase und einer veränderten Empfindlichkeit gegenüber Apoptose in Zusammenhängen in Verbindung gebracht, die für die Krebsbiologie und die Forschung zu neurodegenerativen Erkrankungen relevant sind.
FKBP8 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des FKBP8-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von FKBP8 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die FKBP8-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit FKBP8-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.