FJX1 Plasmide Double Nickase (m): sc-420360-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FJX1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FJX1 Double Nickase Plasmid (m) e il FJX1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Fjx1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FJX1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-420360-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino *Fjx1* codifica four-jointed box 1 (FJX1), una proteina conservata associata al Golgi implicata nella regolazione della polarità planare delle cellule e della morfogenesi tissutale. FJX1 è collegata a vie che controllano la crescita e la formazione dei pattern, inclusa la modulazione degli output della segnalazione Hippo e il crosstalk con processi correlati a Wnt/PCP che influenzano la proliferazione cellulare e l’organizzazione direzionale. Durante lo sviluppo, *Fjx1* contribuisce al comportamento epiteliale coordinato e al modellamento degli organi, rendendolo rilevante per lo studio dei programmi di differenziamento e del controllo morfogenetico. Un’espressione deregolata di FJX1 è stata associata ad alterazioni del controllo della crescita e a fenotipi migratori in contesti patologici, a supporto della sua utilità come nodo meccanicistico negli studi su segnalazione e architettura tissutale.
FJX1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Fjx1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Fjx1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Fjx1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Fjx1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.