FGF-8 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403127

Descripción general

FGF8 codifica el factor de crecimiento de fibroblastos 8 (FGF‑8), un ligando de señalización secretado que se une a receptores de la familia FGFR para regular el patrón embrionario, la morfogénesis tisular y las decisiones de destino celular. FGF‑8 activa vías canónicas de RTK, incluidas RAS–MAPK/ERK, PI3K–AKT y la señalización de PLCγ, e influye en programas de proliferación, migración y diferenciación de manera dependiente del contexto. La expresión desregulada de FGF8 y la actividad de la vía FGFR se han relacionado con anomalías del desarrollo y con redes de señalización oncogénica en múltiples tipos de tumor, donde la señalización alterada de factores de crecimiento puede remodelar programas de linaje e interacciones con el microambiente. En investigación, FGF8 se estudia habitualmente por sus funciones en biología del desarrollo, programas transcripcionales dependientes de factores de crecimiento y el “crosstalk” (intercomunicación) entre vías que controla la homeostasis tisular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FGF-8 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FGF8 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FGF8 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FGF8 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FGF-8.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FGF8 para la investigación de la señalización de FGF-8, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FGF8 críticos para la función de FGF-8
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FGF8 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FGF-8 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FGF-8 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FGF8. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FGF-8 (h) y el plásmido HDR FGF-8 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FGF8 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FGF8 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.