FGF-19 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401725-LAC

FGF19 kodiert den Fibroblasten-Wachstumsfaktor 19 (FGF‑19), einen endokrinen FGF, der gemeinsam mit dem Korezeptor β‑Klotho über Rezeptorsignale die Homöostase der Gallensäuren, den Lipidstoffwechsel und die Energiebilanz reguliert. In Zielgeweben bindet FGF‑19 vor allem an FGFR4 und aktiviert nachgeschaltete MAPK/ERK‑Signalwege sowie damit verbundene transkriptionelle Programme, wodurch Nährstoffsensorik mit der Genexpression im hepatobiliären und metabolischen Kontext verknüpft wird. Eine veränderte FGF19‑Expression oder eine veränderte Aktivität des FGFR4‑Signalwegs wurde mit einer dysregulierten Gallensäuresynthese und metabolischen Funktionsstörungen in Verbindung gebracht; entsprechend wird FGF‑19 häufig im Kontext der Leberbiologie und wachstumsfaktorgetriebener Signalübertragung untersucht. Als sezernierter Ligand unterstützt FGF‑19 zudem mechanistische Untersuchungen parakriner/endokriner Kommunikation und von Signalweg‑Crosstalk in humanen Zellmodellen.

FGF-19 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente FGF19-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

FGF-19 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der FGF19-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen FGF-19-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen FGF19-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.