FGF-17 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405951

Übersicht

FGF17 kodiert den Fibroblasten-Wachstumsfaktor 17 (FGF-17), einen sezernierten, heparinbindenden Liganden, der vor allem über Rezeptor-Tyrosinkinasen der FGFR-Familie signalisiert, um Zellproliferation, Überleben und Linienzuwendung (lineage specification) zu regulieren. Die Aktivität von FGF-17 aktiviert kanonische RTK-Signalkaskaden, darunter RAS–MAPK/ERK und PI3K–AKT, und beeinflusst dadurch Gewebemusterbildung sowie kontextabhängige mitogene Programme. In der Humanbiologie wird eine dysregulierte FGF/FGFR-Signalgebung häufig mit veränderten Entwicklungsverläufen und der Aktivierung onkogener Signalwege in Verbindung gebracht, wodurch FGF17 ein hilfreicher Knotenpunkt für die Untersuchung wachstumsfaktorgetriebener Signaldynamiken ist. Die Erforschung von FGF17 unterstützt mechanistische Studien zu parakriner/autokriner Kommunikation, durch die extrazelluläre Matrix modulierter Ligandenverfügbarkeit sowie Signalweg-Crosstalk, der krankheitsrelevante Phänotypen prägen kann.

Das FGF-17 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des FGF17-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des FGF17-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von FGF17 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die FGF-17-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von FGF17-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der FGF-17-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf FGF17-Exone abzielen, die für die FGF-17-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere FGF17-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom FGF-17 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom FGF-17 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des FGF17-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das FGF-17 HDR-Plasmid (h) und FGF-17 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von FGF17-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten FGF17-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.