Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ferritin light chain Double Nickase Plasmid (h): sc-400924-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das ferritin light chain Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- ferritin light chain Double-Nickase-Plasmid (h) und ferritin light chain Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf FTL abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: ferritin light chain: sc-74513
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
ferritin light chain Double Nickase Plasmid (h) | sc-400924-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ferritin light chain Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400924-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FTL kodiert die Ferritin‑Leichtkette, eine zentrale Untereinheit des zytosolischen Ferritin‑Komplexes, der überschüssiges zweiwertiges Eisen (Fe²⁺) sequestriert und eisenkatalysierte oxidative Schäden begrenzt. Durch die Kontrolle der Verfügbarkeit von labilem Eisen unterstützt FTL die Eisenhomöostase, das Redoxgleichgewicht und nachgeschaltete Prozesse einschließlich mitochondrialem Stoffwechsel, DNA‑Synthese und Stressantworten. Die Ferritin‑Dynamik überschneidet sich mit Signalwegen, die die Anfälligkeit für Ferroptose, inflammatorische Signalgebung und den autophagischen Abbau von Ferritin (Ferritinophagie) steuern, wodurch FTL mit der zellulären Anpassung unter Nährstoff‑ oder oxidativem Stress verknüpft ist. Eine veränderte FTL‑Expression oder Ferritin‑Regulation wird in Studien zu Eisenüberladung, neurodegenerativen Prozessen, Infektionsbiologie und dem Stoffwechsel von Krebszellen häufig als molekularer Readout verwendet.
ferritin light chain Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des FTL-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von FTL abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die FTL-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit FTL-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.